EP0056073A1 - Verfahren zur Aufbereitung von Tabak und Tabak, aufbereitet nach diesem Verfahren - Google Patents

Verfahren zur Aufbereitung von Tabak und Tabak, aufbereitet nach diesem Verfahren Download PDF

Info

Publication number
EP0056073A1
EP0056073A1 EP81107416A EP81107416A EP0056073A1 EP 0056073 A1 EP0056073 A1 EP 0056073A1 EP 81107416 A EP81107416 A EP 81107416A EP 81107416 A EP81107416 A EP 81107416A EP 0056073 A1 EP0056073 A1 EP 0056073A1
Authority
EP
European Patent Office
Prior art keywords
tobacco
protein
solution
enzyme
biomass
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
EP81107416A
Other languages
English (en)
French (fr)
Other versions
EP0056073B1 (de
Inventor
Helmut Gaisch
Patrick Daniel Louis Ghiste
Dieter Schulthess
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Philip Morris Products SA
Original Assignee
Fabriques de Tabac Reunies SA
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Fabriques de Tabac Reunies SA filed Critical Fabriques de Tabac Reunies SA
Publication of EP0056073A1 publication Critical patent/EP0056073A1/de
Application granted granted Critical
Publication of EP0056073B1 publication Critical patent/EP0056073B1/de
Expired legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A24—TOBACCO; CIGARS; CIGARETTES; SIMULATED SMOKING DEVICES; SMOKERS' REQUISITES
    • A24B—MANUFACTURE OR PREPARATION OF TOBACCO FOR SMOKING OR CHEWING; TOBACCO; SNUFF
    • A24B15/00—Chemical features or treatment of tobacco; Tobacco substitutes, e.g. in liquid form
    • A24B15/18—Treatment of tobacco products or tobacco substitutes
    • A24B15/20—Biochemical treatment

Definitions

  • the invention relates to a process for the preparation of tobacco in which initially insoluble protein constituents and protein subunits are broken down into soluble protein fragments by enzymatic treatment and then the soluble constituents are dissolved in water and the solution obtained is separated from the treated tobacco and tobacco, prepared by this process .
  • the object of the inventive method is to achieve a processed tobacco whose content of protein components and their subunits is considerably reduced, but whose content of other soluble components is not reduced as far as possible.
  • the inventive method is characterized in that from the separated solution by metabolic assimilation caused by microorganisms and subsequent separation of the Biomass protein components and protein subunits and low molecular nitrogen compounds are eliminated and the solution components remaining in the residual solution are added to pretreated tobacco.
  • low-molecular nitrogen compounds such as amines, ammonia, nitrate and, if present, nitrite
  • the enzymatic treatment is advantageously carried out in a mixture of crushed tobacco and water in a weight ratio of 1: 3 to 1:12, preferably 1: 5. Crushed, dried, green tobacco or shredded tobacco waste can be used. If the tobacco is used in powder form, a weight ratio of tobacco to water of 1: 3 to 1: 5 is sufficient.
  • the enzymatic treatment in a slurry is advantageous because it promotes an intensive action of the enzyme on the protein components and protein subunits. On the other hand, if you use whole tobacco leaves or strips - that is, stripped tobacco leaves - you need a weight ratio of tobacco to water from 1: 8 to 1:12, preferably 1:10.
  • the optimal conditions for enzymatic treatment with regard to the tobacco-water ratio, the pH value, the solution and the treatment temperature depend on the enzyme used in each case. You may find them by trying.
  • the optimal treatment temperature for most enzymes is between 30 0 C (degrees Celsius) and 70 ° C. Many enzymes, including proteases, have an optimum at 37 ° C. There are also proteases that are most active at much higher temperatures, such as detergent enzymes.
  • the optimum pH value for many enzymes is between pH 7.0 and pH 7.5. However, the exception of the P ro- acidic proteases, such as pepsin, the pH optimum is between 1.5 and 4.
  • the optimal pH is preferably adjusted with 1 N KOH ( 1 normal potassium hydroxide solution) or 85% H 3 PO 4 (phosphoric acid).
  • the enzyme is used at a concentration which is selected so large that at the optimum for the used active enzyme treatment temperature ranging between 30 0 C and 70 ° C, optimum pH and stirring continuously before the enzyme 9/10 lost its original activity, the tobacco content of insoluble proteins and protein subunits is reduced to 20 to 40% (percent), preferably 33%, of the initial value.
  • the desired protein reduction is not achieved by the specified enzyme breakdown, then a higher enzyme concentration is expediently used; if the desired protein reduction is achieved before the specified enzyme degradation has taken place, then the enzyme concentration was set unnecessarily high and can be reduced for later batches. So it is easy to find the concentration that is advantageous for the enzyme used by trying. If the enzyme concentration is found to be optimal, the protein reduction can be done less by stopping the treatment prematurely. Then the enzyme was not used.
  • Enzymes with proteolitic activity can be used; most bacterially and mycologically formed proteolitic enzymes are suitable here. It can be pure enzymes or enzyme mixtures. A selection of suitable enzymes is given in TABLE 1 at the end of the description.
  • the separated solution is expediently sterilized and then inoculated with a culture of microorganisms which has the ability to assimilate protein and protein subunits, mainly amino acids, and has been brought into its exponential growth phase and, with the addition of sugar, favorable living conditions for them Culture is kept until at least 95% of the dissolved protein fragments and other low-molecular nitrogen compounds are used as building materials for the cell's own protein of the microorganisms. Then the metabolic assimilation is stopped by separating the biomass.
  • Sterilization and use in the exponential growth phase ensure that the selected culture is selective and is not contaminated by other microorganisms. Stopping metabolic assimilation ensures that only the desired reactions are caused.
  • Flavorings desired in tobacco smoke are formed when the tobacco burns off through the decomposition of certain amadori compounds, which in turn arise during the thermal reaction of certain amino acids with sugar. These amino acids may not be present in the tobacco treated and mixed with the residual solution in amounts sufficient for optimum aroma formation. The salaries could be replenished by adding such amino acids or Amadori compounds. But from the viewpoint that as no F remd- the tobacco materials are to be added, and also from a cost point unfavorable.
  • the invention therefore proposes to destructively hydrolyze the proteins contained in the separated biomass, the hydrolysis conditions being chosen so that those amino acids, such as tryptophan, which cannot be converted into such amadori compounds with reducing sugar and heating (Maillard reaction), which release tobacco flavors during thermal decomposition, are selectively destroyed, and then the other amino acids are reacted with reducing sugar in amadori compounds, such as, for example, aspartic acid, leucine, arginine, threonine, glutamine, glycine and valine, and that the amadori compounds thus obtained are pretreated Tobacco can be added.
  • amadori compounds such as, for example, aspartic acid, leucine, arginine, threonine, glutamine, glycine and valine
  • the solution constituents remaining in the residual solution and / or the amino acids separated from the biomass and / or the amadori compounds obtained therefrom are preferably added to the pretreated tobacco in finely divided form in an aqueous medium with subsequent drying of the enriched, pretreated tobacco.
  • a recycled, suitably as a smoking product tobacco is achieved, which is characterized by a protein content of from 2 up to 1 0, preferably 3, dry weight per cent and a AmadoriENSsgehalt from 0.1 to 10, preferably 5.0, dry weight per cent.
  • the amadori compounds are those that release tobacco flavors when thermally decayed.
  • Cigarettes made from such tobacco gave the analytical values given in TABLE 2 at the end of the description.
  • the pretreated tobacco that is the pressed strips, was dried in flowing warm air to a residual moisture content of 18% (percent) and stored.
  • the tobacco mixture to be prepared, the solution and the pretreated tobacco were analyzed analytically. This resulted in analytical values as in TABLE 3.
  • TABLE 3 shows that 58 percent by dry weight of the proteins present in the tobacco mixture to be processed has been broken down and the breakdown products have been converted into the solution.
  • the solution prepared in this way was sterilized in an autoclave at 105 ° C. under pressure and then relieved of pressure and cooled to 30 ° C. and transferred to a 20 l fermenter.
  • the 30 ° C, prepared solution was inoculated with 600 ml (milliliter) of a culture of Candida utilis NCYC 707 which is in its exponential growth phase.
  • the inoculated solution was left in the fermenter for 8 hours with aeration and stirring.
  • the pH was first stabilized to pH 5.5 with KOH (potassium hydroxide) and later with citric acid.
  • the proteins, amino acids, nitrates and nitrites were broken down by metabolic assimilation.
  • the biomass was centrifuged off. This gave 2.25 l of biomass with a solids content of 16%, corresponding to 360 g of anhydrous biomass.
  • the supernatant obtained by centrifugation - the so-called residual solution - contained the tobacco alkaloids in the originally present concentration, but beyond that only traces of soluble nitrogen compounds.
  • the total volume of the residual solution was 9.75 liters, which were kept at 20 ° C. until later use.
  • the filtered-off biomass was boiled with 1 1 6N hydrochloric acid under reflux for 15 hours in a round bottom flask.
  • the biomass disintegrated and the proteins were destructively hydrolyzed, the amino acid tryptophan being destroyed to such an extent that it was no longer detectable analytically after the hydrolysis.
  • the hydrolyzate was separated from the biomass residues by filtration, the excess hydrochloric acid escaping.
  • the dry residue which consisted largely of amino acids, was mixed with 100 ml of water and the insoluble residue was filtered off. An amino acid mixture with a water content of about 50% was obtained.
  • This amino acid mixture was adjusted to pH 7 with NH 4 0H (ammonium hydroxide) and 100 g of glucose were added and the mixture was boiled under reflux in a round-bottomed flask for 2 hours, the round-bottomed flask browning and amadori compounds being formed. The still hot contents of the flask were washed out with the previously obtained residual solution, so that the soluble amadori compounds passed into the residual solution.
  • NH 4 0H ammonium hydroxide
  • the tobacco thus obtained had or had its full original aroma and contained alkaloid nitrogen, that is to say nicotine, in the original concentration.
  • alkaloid nitrogen that is to say nicotine
  • the content of protein nitrogen was reduced by 58% and the content of amine, ammonia and nitrate nitrogen by 90% compared to the original content in the tobacco used.
  • Example 1 the Candida utilis NCYC 707 were used as microorganisms.
  • Other microorganisms which have the ability to assimilate proteins and protein subunits and which can be used instead of the Candida utilis NCYC 707 are in TABLE 5

Abstract

Zur Aufbereitung von Tabak werden die unlöslichen Proteine zunächst durch enzymatische Behandlung löslich gemacht, ausgelöst und dann in der Lösung durch metabolische Assimilation eliminiert. Die übrigen Lösungsbestandteile werden an den Tabak zurückgegeben.

Description

  • Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Aufbereitung von Tabak bei dem zunächst unlösliche Proteinbestandteile und.Proteinuntereinheiten durch enzymatische Behandlung in lösliche Proteinfragmente zerlegt werden und dann die löslichen Bestandteile in Wasser gelöst werden und die gewonnene Lösung vom behandelten Tabak abgetrennt wird und Tabak, aufbereitet nach diesem Verfahren.
  • Bei einem aus der US-PS 3 132 651 bekannten Verfahren, bei dem durch Enzyme der Alterungsprozeß - sogenanntes aging - beschleunigt und Nikotin entfernt werden soll, werden aus dem Tabak Proteinbestandteile zusammen mit löslichen Inhaltsstoffen des Tabaks extrahiert. Man gewinnt so einen aufbereiteten Tabak, in dem zwar die Proteinbestandteile, die dort unerwünscht sind, fehlen, der aber außerdem viele seiner löslichen Inhaltsstoffe entbehrt und damit nur noch ein kaum genießbares Tabakprodukt ist.
  • Dem erfinderischen Verfahren liegt die Aufgabe zugrunde, einen aufbereiteten Tabak zu erzielen, dessen Gehalt an Proteinbestandteilen und deren Untereinheiten erheblich reduziert ist, dessen Gehalt an übrigen löslichen Bestandteilen jedoch möglichst nicht reduziert ist.
  • Das erfinderische Verfahren ist dadurch gekennzeichnet, daß aus der abgetrennten Lösung durch von Mikroorganismen hervorgerufene, metabolische Assimilation und anschließendes Abtrennen der Biomasse Proteinbestandteile und Proteinuntereinheiten und niedermolekulare Stickstoffverbindungen eliminiert werden und daß die in der Restlösung verbleibenden Lösungsbestandteile vorbehandeltem Tabak zugesetzt werden.
  • Durch die metabolische Assimilation gelangen die unerwünschten Proteinbestandteile und deren Untereinheiten sowie niedermolekulare Stickstoffverbindungen, wie Amine, Ammoniak, Nitrat und, falls vorhanden, Nitrit in die Biomasse, während die übrigen löslichen Bestandteile, die aus dem Tabak herausgelöst wurden, im wesentlichen in der Restlösung verbleiben und dem Tabak gegebenenfalls nach Einengung der Restlösung wieder zugesetzt werden können.
  • Im grünen Tabak sind die meisten Proteinbestandteile löslich, so daß man sie ohne enzymatische Behandlung herauslösen könnte. Das empfiehlt sich aber nicht, weil dann diese Proteinbestandteile nicht mehr bei der Trocknung, dem sogenannten curing, zur Verfügung stehen, bei der sie eine wichtige Funktion übernehmen. Beim Trocknen jedoch wird ein Großteil er ursprünglich löslichen Proteinbestandteile denaturiert zu unlöslichen Proteinuntereinheiten. Diese können dann aber-nach dem erfinderischen Verfahren durch die vorgesehene enzymatische Vorbehandlung größtenteils wieder löslich gemacht werden.
  • Die enzymatische Behandlung erfolgt.zweckmäßig in einer Mischung aus zerkleinertem Tabak und Wasser im Gewichtsverhältnis 1 : 3 bis 1 : 12, vorzugsweise 1 : 5. Dabei kann man zerkleinerten, getrockneten, grünen Tabak oder zur Wiederaufbereitung zerkleinerte Tabakabfälle einsetzen. Wenn man den Tabak pulverisiert einsetzt, genügt ein Gewichtsverhältnis von Tabak zu Wasser von 1 : 3 bis 1 : 5. Die enzymatische Behandlung in einer Aufschlämmung ist vorteilhaft, weil dadurch eine intensive Einwirkung des Enzyms auf die Proteinbestandteile und Proteinuntereinheiten begünstigt wird. Wenn man dagegen ganze Tabakblätter oder Strips - das sind entrippte Tabakblätter - einsetzt, benötigt man ein Gewichtsverhältnis von Tabak zu Wasser von 1 : 8 bis 1 : 12, vorzugsweise 1 : 10. Die optimalen Bedingungen bei enzymatischer Behandlung hinsichtlich des Tabak-Wasser-Verhältnisses, des pH-Wertes, der Lösung und der Behandlungstemperatur hängen von dem jeweils eingesetzten Enzym ab. Man findet sie gegebenenfalls durch Probieren. Die optimale Behandlungstemperatur bei den meisten Enzymen liegt im Bereich zwischen 300C (Grad Celsius) und 70°C. Viele Enzyme, auch die Proteasen, haben ein Optimum bei 37°C. Daneben gibt es aber auch Proteasen, die bei wesentlich höheren Temperaturen am aktivsten sind, zum Beispiel Waschmittelenzyme. Der optimale pH-Wert liegt für viele Enzyme im Bereich zwischen pH 7,0 und pH 7,5. Eine Ausnahme bilden jedoch die sauren Pro- teasen, zum Beispiel Pepsin, deren pH-Optimum zwischen 1,5 und 4 liegt. Der optimale pH-Wert wird vorzugsweise mit 1 N KOH ( 1 normale Kaliumhydroxydlösung) oder 85 %iger H3PO4 (Phosphorsäure) eingestellt.
  • Vorzugsweise wird das Enzym mit einer Konzentration eingesetzt, die so groß gewählt ist, daß bei für das eingesetzte, aktive Enzym optimaler Behandlungstemperatur im Bereich zwischen 300C und 70°C, optimalem pH-Wert und unter ständigem Umrühren ehe das Enzym 9/10 seiner ursprünglichen Aktivität verloren hat, der Gehalt des Tabaks an unlöslichen Proteinstoffen und Proteinuntereinheiten auf 20 bis 40 % (Prozent), vorzugsweise 33 %, des Ausgangswertes reduziert wird.
  • Erreicht man bis zu dem angegebenen Enzymabbau die angestrebte Proteinreduktion nicht, dann wird zweckmäßig eine höhere Enzymkonzentration eingesetzt; erreicht man die angestrebte Proteinreduktion schon ehe der angegebene Enzymabbau stattgefunden hat, dann war die Enzymkonzentration unnötig hoch angesetzt und man kann sie für spätere Chargen reduzieren. So findet man durch Probieren leicht die für das jeweils eingesetzte Enzym vorteilhafte Konzentration. Man kann bei so als optimal ermittelten Enzymkonzentration die Proteinreduktion weniger weit treiben, indem man die Behandlung vorzeitig abbricht. Dann hat man aber das Enzym nicht ausgenutzt.
  • Als Enzyme'können solche mit proteolitischer Aktivität verwendet werden; die meisten bakteriell und mycologisch'gebildeten proteolitischen Enzyme sind hier geeignet. Es kann sich dabei um reine Enzyme oder um Enzymgemische handeln. Eine Auswahl geeigneter Enzyme ist in TABELLE 1 am Schluß der Beschreibung angegeben.
  • Für die metabolische Assimilation wird zweckmäßig die abgetrennte Lösung sterilisiert und dann mit einer in ihre exponentielle Wachstumsphase versetzten Kultur von Mikroorganismen, die die Fähigkeit besitzen, Protein und Proteinuntereinheiten, hauptsächlich Aminosäuren, zu assimilieren, angeimpft wird und unter Zugabe von Zucker auf günstigen Lebensbedingungen für diese Kultur gehalten wird, bis die gelösten Proteinfragmente und anderen niedermolekularen Stickstoffverbindungen zu mindestens 95 % als Aufbaustoffe für das zelleigene Protein der Mikroorganismen verbraucht sind. Dann wird die metabolische Assimilation abgebrochen durch Abtrennen der Biomasse.
  • Durch die Sterilisation und den Einsatz in exponentieller Wachstumsphase wird sichergestellt, daß die ausgewählte Kultur selektiv tätig ist und nicht durch andere Mikroorganismen verseucht wird. Durch den Abbruch der metabolischen Assimilation wird sichergestellt, daß nur die erwünschten Reaktionen hervorgerufen werden.
  • Im Tabakrauch erwünschte Aromastoffe bilden sich beim Abbrennen des Tabaks durch Zersetzung von bestimmten Amadoriverbindungen, die ihrerseits bei der thermischen Reaktion bestimmter Aminosäuren mit Zucker entstehen. Diese Aminosäuren sind in dem behandelten und mit der Restlösung versetzten Tabak unter Umständen nicht in für eine optimale Aromabildung hinreichenden Mengen vorhanden. Man könnte die Gehälter auffüllen durch Fremdzusatz solcher Aminosäuren oder Amadoriverbindungen. Das ist aber unter dem Gesichtspunkt, daß möglichst keine Fremd- stoffe dem Tabak zugesetzt werden sollen, und auch unter Kostengesichtspunkten ungünstig.
  • Die Erfindung schlägt daher vor, die in der abgetrennten Biomasse enthaltenen Proteine destruktiv zu hydrolisieren, wobei die Hydrolysebedingungen so gewählt werden, daß diejenigen Aminosäuren, wie zum Beispiel Tryptophan, die mit reduzierendem Zucker und Erhitzen (Maillard Reaktion) nicht in solche Amadoriverbindungen umsetzbar sind, die beim thermischen Zersetzen Tabakaromen freisetzen, selektiv zerstört werden, und daß dann die anderen Aminosäuren mit reduzierendem Zucker in Amadoriverbindungen, wie zum Beispiel Asparaginsäure, Leucin, Arginin, Threonin, Glutamin, Glycin und Valin, umgesetzt werden und daß die so gewonnenen Amadoriverbindungen dem vorbehandelten Tabak zugesetzt werden.
  • Durch die metabolische Assimilation der Mikroorganismen liegen unter Umständen größere Mengen von diesen Aminosäuren in der Biomasse vor als in der abgetrennten Lösung vorhanden waren, wodurch ohne besonderes Zutun ein wünschenswerter Gewinn an diesen für die Aromabildung wichtigen Aminosäuren erzielbar ist.
  • Das Zusetzen der in der Restlösung verbliebenen Lösungsbestandteile und/oder der aus der Biomasse separierten Aminosäuren und/oder'der daraus gewonnenen Amadoriverbindungen an den vorbehandleten Tabak erfolgt vorzugsweise fein verteilt in wässrigem Milieu mit anschließender Trocknung des angereicherten, vorbehandelten Tabaks.
  • Wenn hier und im folgenden davon gesprochen wird, daß dem Tabak Substanzen extrahiert werden und andere Substanzen daraus wieder zugesetzt werden, dann muß das sich nicht unbedingt auf die gleiche Tabakcharge beziehen. Man kann einer ersten Tabakcharge Substanzen entziehen und die wieder zuzusetzenden Sub- stanzen einer zweiten Tabakcharge, die vorher einer entsprechenden Extraktion unterzogen wurde, wieder zusetzen.
  • Mit dem erfinderischen Verfahren ist ein aufbereiteter, als Rauchprodukt geeigneter Tabak erzielbar, der gekennzeichnet ist durch einen Proteingehalt von 2 bis 10, vorzugsweise 3, Trockengewichtsprozent und einen Amadoriverbindungsgehalt von 0,1 bis 10, vorzugsweise 5,0, Trockengewichtsprozent. Bei den Amadoriverbindungen handelt es sich um diejenigen, die beim thermischen Zerfall Tabakaromen freisetzen.
  • Zigaretten, die aus solchem Tabak hergestellt wurden, ergaben die in TABELLE 2 am Schluß der Beschreibung angegebenen Analysewerte.
  • Die Erfindung wird nun anhand einiger Beispiele näher erläutert.
    • Beispiel 1
  • In 10 1 (Liter) Wasser wurden 3,75 g (Gramm) des Enzyms Protease EC 3.4.24.4 mit einer Enzymaktivität von 1,0 Enzymeinheit pro mg (Milligramm) gelöst. Eine Enzymeinheit ist diejenige Aktivität, die Casein bei pH 7,5 und 37°C (Grad Celsius) dermaßen hydrolisiert, daß pro Minute die Menge von 1 Mykromol Tyrosin freigesetzt wird. In diese 10 1 Enzymlösung wurden 1 kg (Kilogramm) aufzubereitende Tabakmischung (American Blend) in Form von sogenannten Strips (entrippte Blätter) eingeschlämmt. Diese Schlämme wurde 6 Stunden bei 37°C stehengelassen und dabei gelegentlich umgerührt. Dann wurde die wässrige Phase von den Strips abgetrennt und danach wurden die Strips zweimal mit je 2,5 1 Wasser von 80°C gewaschen und anschließend ausgepreßt. Die wässrige Phase, das Waschwasser und die beim Auspressen anfallende Flüssigkeit wurde zur Lösung vereinigt. Es ergaben sich insgesamt 12 1 Lösung.
  • Der vorbehandelte Tabak, das sind die ausgepreßten Strips, wurde in strömender Warmluft bis auf eine Restfeuchte von 18 % (Prozent) getrocknet und aufbewahrt. Die aufzubereitende Tabakmischung, die Lösung und der vorbehandelte Tabak wurden analytisch untersucht. Es ergaben sich dabei Analysenwerte wie in TABELLE 3 .
    • angegeben.
  • Die TABELLE 3 ' zeigt, daß 58 Trockengewichtsprozent der in der aufzubereitenden, eingesetzten Tabakmischung vorhandenen Proteine abgebaut worden sind und die Abbauprodukte in die Lösung überführt wurden.
  • In die 12 1 Lösung wurden folgende Zusätze eingegeben:
    • Glukose (40 g per 1,086 g N03-N + NH2/NH3-N) .......... 506 g KH2PO4 (Kaliumhydrophosphat) (0,2 % pro Extraktmenge) . 24 g.
  • Die so aufbereitete Lösung wurde in einem Autoklaven bei 105°C unter Druck sterilisiert und dann druckentlastet und auf 30°C abgekühlt und in einen 20 1 Fermenter überführt. Die 30°C warme, aufbereitete Lösung wurde mit 600 ml (Milliliter) einer sich in ihrer exponentiellen Wachstumsphase befindenden Kultur von Candida utilis NCYC 707.angeimpft. Die angeimpfte Lösung wurde 8 Stunden lang unter Belüftung und laufendem Umrühren im Fermenter belassen. Der pH-Wert wurde zunächst mit KOH (Kaliumhydroxyd) und später mit Zitronensäure auf pH 5,5 stabilisiert. Dabei wurden die Proteine, Aminosäuren, Nitrate und Nitrite durch metabolische Assimilation abgebaut. Nach Ablauf der 8 Stunden wurde die Biomasse abzentrifugiert. Man erhielt 2,25 1 Biomasse mit einem Feststoffgehalt von 16 %, entsprechend 360 g wasserfreier Biomasse.
  • Der durch das Zentrifugieren gewonnene überstand - die sogenannte Restlösung - enthielt die Tabakalkaloide in der ursprünglich vorhandenen Konzentration, darüberhinaus aber nur noch Spuren an löslichen Stickstoffverbindungen. Das Gesamtvolumen der Restlösung betrug 9,75 1, die bis zur späteren Weiterverwendung bei 20°C aufbewahrt wurden.
  • Die abfiltrierte Biomasse wurde mit 1 1 6N Salzsäure 15 Stunden in einem Rundkolben unter Rückfluß gekocht. Dabei zerfiel die Biomasse und die Proteine wurden destruktiv hydrolisiert, wobei die Aminosäure Tryptophan so weitgehend zerstört wurde, daß sie analytisch nach der Hydrolyse nicht mehr nachweisbar war.
  • Das Hydrolysat wurde von den Rückständen der Biomasse durch Filtrieren getrennt, wobei die überschüssige Salzsäure entwich. Der Trockenrückstand, der zu einem großen Teil aus Aminosäuren bestand, wurde mit 100 ml Wasser angerührt und vom unlöslichen Rückstand abfiltriert. Man erhielt ein Aminosäurengemisch mit einem Wassergehalt von etwa 50 %.
  • Dieses Aminosäurengemisch wurde mit NH40H (Ammoniumhydroxyd) auf pH 7 eingestellt und mit 100 g Glukose versetzt und 2 Stunden unter Rückfluß in einem Rundkolben gekocht, wobei sich der Rundkolben bräunte und Amadoriverbindungen gebildet wurden. Der noch heiße Kolbeninhalt wurde mit der vorher gewonnenen Restlösung ausgewaschen, so daß die löslichen Amadoriverbindungen in die Restlösung übergingen.
  • Die so gewonnene, nun mit Amadoriverbindungen angereicherte Restlösung wurde auf den vorbehandelten Tabak, also die ausgepreßten Strips, in einer rotierenden Flavourtrommel aufgesprüht, wobei während des Sprühens das überschüssige Wasser durch Einblasen von Warmluft abgedampft wurde.
  • Der so gewonnene, aufbereitete Tabak hatte beziehungsweise entfaltete sein volles ursprüngliches Aroma und enthielt Alkaloidstickstoff, das heißt Nikotin, in der ursprünglichen Konzentration. Dagegen war der Gehalt an Proteinstickstoff um 58 % und der Gehalt an Amin-, Ammoniak- und Nitratstickstoff um 90 % gegenüber den ursprünglichen Gehältern im eingesetzten Tabak reduziert.
    • Beispiel 2 bis 22
  • Diese Beispiele unterscheiden sich vom Beispiel 1 nur durch die aus TABELLE 4 ersichtlichen Sachverhalte.
  • In den Beispielen 1 bis 22 wurden als Mikroorganismen die Candida utilis NCYC 707 eingesetzt. Weitere Mikroorganismen, die die Fähigkeit besitzen, Proteine und Proteinuntereinheiten zu assimilieren, und die anstelle der Candida utilis NCYC 707 einsetzbar sind, sind in TABELLE 5
    • angegeben.
  • Figure imgb0001
  • TABELLE 2
  • Analysenwerte
    Figure imgb0002
    Figure imgb0003
    Figure imgb0004
    Figure imgb0005
    Figure imgb0006
    Figure imgb0007
    Figure imgb0008
    Figure imgb0009

Claims (10)

1. Verfahren zur Aufbereitung von Tabak, bei dem zunächst unlösliche Proteinbestandteile und Proteinuntereinheiten durch enzymatische Behandlung in lösliche Proteinfragmente zerlegt werden und dann die löslichen Bestandteile in Wasser gelöst werden und die gewonnene Lösung vom behandelten Tabak abgetrennt wird, dadurch gekennzeichnet, daß aus der abgetrennten Lösung durch von Mikroorganismen hervorgerufene, metabolische Assimilation und anschließendes Abtrennen der Biomasse Proteinbestandteile und Proteinuntereinheiten und niedermolekulare Stickstoffverbindungen eliminiert werden und daß die in der Restlösung verbleibenden Lösungsbestandteile vorbehandeltem Tabak zugesetzt werden.
2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß zur Aufbereitung von grünem Tabak dieser zunächst unter Denaturie- rung löslicher Proteinbestandteile in unlösliche Proteinuntereinheiten getrocknet wird (curing) und erst dann der enzymatischen Behandlung unterworfen wird.
3. Verfahren nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, daß zur Aufbereitung von zerkleinertem, getrockneten, grünen Tabak und zur Wiederaufbereitung von zerkleinerten Tabakabfäl- len aus dem Tabak und Wasser im Gewichtsverhältnis 1 : 3 bis 1 : 12, vorzugsweise 1 : 5, eine Aufschlämmung gebildet wird, die dann der enzymatischen Behandlung unterworfen wird.
4. Verfahren nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß die enzymatische Behandlung mit einem Enzym mit proteolitischer Aktivität in einer Tabak-Wasser-Aufschlämmung im Gewichtsverhältnis 1 : 3 bis 1 : 12, vorzugsweise 1 : 5, und mit einer Enzymkonzentration erfolgt, die so groß gewählt ist, daß bei für das eingesetzte, aktive Enzym optimaler Behandlungstemperatur im Bereich zwischen 30° C (Grad Celsius) und 70°C, optimalem pH-Wert und unter ständigem Umrühren .ehe das Enzym 9/10 seiner ursprünglichen Aktivität verloren hat, der Gehalt des Tabaks an unlöslichen Proteinstoffen und Proteinuntereinheiten auf 20 bis 40 % (Prozent), vorzugsweise 33 %, des Ausgangswertes reduziert wird.
55. Verfahren nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß zur metabolischen Assimilation die abgetrennte Lösung sterilisiert und dann mit einer in ihre exponentielle Wachstumsphase versetzten-Kultur von Mikroorganismen, die die Fähigkeit besitzen, Proteine und Proteinuntereinheiten zu assimilieren, angeimpft wird und unter Zugabe von Zucker auf günstigen Lebensbedingungen für diese Kultur gehalten wird, bis die gelösten Proteinfragmente und anderen niedermolekularen Stickstoffverbindungen zu mindestens 95 % als Aufbaustoffe für das zelleigene Protein der Mikroorganismen verbraucht sind und daß dann die metabolische Assimilation abgebrochen wird durch Abtrennen der Biomasse.
6. Verfahren nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß in der abgetrennten Biomasse enthaltene Proteine destruktiv hydrolisiert werden, derart, daß diejenigen Aminosäuren, die mit reduzierendem Zucker und Erhitzen (Maillard Reaktion) nicht in solche Amadoriverbindungen umsetzbar sind, die beim thermischen Zersetzen Tabakaromen freisetzen, selektiv zerstört werden und daß dann die anderen Aminosäuren mit reduzierendem Zucker in Amadoriverbindungen umgesetzt werden und daß die so gewonnenen Amadoriverbindungen dem vorbehandelten Tabak zugesetzt werden.
7. Verfahren nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß das Zusetzen der in der Restlösung verbliebenen Lösungsbestandteile und/oder der aus der Biomasse separierten Aminosäuren an den vorbehandelten Tabak fein verteilt erfolgt im wässrigen Milieu mit anschließender Trocknung des angereicherten, vorbehandelten Tabaks.
8. Tabak, aufbereitet nach einem Verfahren aus einem der vorhergehenden Ansprüche, gekennzeichnet durch einen Proteingehalt von 2 bis 10, vorzugsweise 3 Trockengewichtsprozent und einen Amadoriverbindungsgehalt von 0,1 bis 10, vorzugsweise 5,0 Trockengewichtsprozent.
Der Stamm CBS 359 ist falsch zitiert. Dem richtig zitierten Stamm DSM 70167 entspricht der NCYC 359. Ein Beleg für diese Entsprechung ist beigefügt. Es wird gebeten, diesen Fehler in den Amtsakten zu korrigieren und den Fehler zu entschuldigen. Die geänderte Seite 18 ist beigefügt.
Figure imgb0010
EP81107416A 1981-01-13 1981-09-18 Verfahren zur Aufbereitung von Tabak und Tabak, aufbereitet nach diesem Verfahren Expired EP0056073B1 (de)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE3100715A DE3100715A1 (de) 1981-01-13 1981-01-13 Verfahren zur aufbereitung von tabak und tabak, aufbereitet nach diesem verfahren
DE3100715 1981-01-13

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EP0056073A1 true EP0056073A1 (de) 1982-07-21
EP0056073B1 EP0056073B1 (de) 1984-11-07

Family

ID=6122481

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EP81107416A Expired EP0056073B1 (de) 1981-01-13 1981-09-18 Verfahren zur Aufbereitung von Tabak und Tabak, aufbereitet nach diesem Verfahren
EP82100112A Expired EP0056268B1 (de) 1981-01-13 1982-01-09 Verfahren zur Aufbereitung von Tabak

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EP82100112A Expired EP0056268B1 (de) 1981-01-13 1982-01-09 Verfahren zur Aufbereitung von Tabak

Country Status (3)

Country Link
US (2) US4407307A (de)
EP (2) EP0056073B1 (de)
DE (3) DE3100715A1 (de)

Families Citing this family (64)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3100715A1 (de) * 1981-01-13 1982-07-22 Fabriques de Tabac Réunies S.A., 2003 Neuchâtel Verfahren zur aufbereitung von tabak und tabak, aufbereitet nach diesem verfahren
US4685478A (en) * 1981-10-01 1987-08-11 Philip Morris Incorporated Thermophilic denitrification of tobacco
US4651759A (en) * 1983-04-12 1987-03-24 Philip Morris Incorporated Start-up process for the thermophilic denitrification of tobacco
US4476881A (en) * 1983-05-09 1984-10-16 Brown & Williamson Tobacco Corporation Microbial digestion of tobacco materials using mixed cultures
US4700727A (en) * 1985-12-20 1987-10-20 Challenger Industries, Ltd. Method of treating lettuce and other leafy vegetable plants and products produced therefrom
US4716911A (en) * 1986-04-08 1988-01-05 Genencor, Inc. Method for protein removal from tobacco
US4887618A (en) * 1988-05-19 1989-12-19 R. J. Reynolds Tobacco Company Tobacco processing
US4941484A (en) * 1989-05-30 1990-07-17 R. J. Reynolds Tobacco Company Tobacco processing
US5060669A (en) * 1989-12-18 1991-10-29 R. J. Reynolds Tobacco Company Tobacco treatment process
US5099862A (en) * 1990-04-05 1992-03-31 R. J. Reynolds Tobacco Company Tobacco extraction process
US5343879A (en) * 1991-06-21 1994-09-06 R. J. Reynolds Tobacco Company Tobacco treatment process
US5311886A (en) * 1991-12-31 1994-05-17 Imasco Limited Tobacco extract treatment with insoluble adsorbent
US5413122A (en) * 1992-02-18 1995-05-09 R. J. Reynolds Tobacco Company Method of providing flavorful and aromatic compounds
US5839447A (en) * 1993-01-11 1998-11-24 Lesser; Craig Cigarette filter containing microcapsules and sodium pyroglutamate
US5501238A (en) * 1993-01-11 1996-03-26 Von Borstel; Reid W. Cigarette filter containing a humectant
US5746231A (en) * 1993-01-11 1998-05-05 Craig Lesser Tobacco smoke filter for removing toxic compounds
US6591841B1 (en) 1996-08-01 2003-07-15 Jackie Lee White Method of providing flavorful and aromatic tobacco suspension
US6053175A (en) * 1998-03-03 2000-04-25 D'angelo; Carmen A. Method for treating smoking article
US6048404A (en) * 1998-05-07 2000-04-11 R.J. Reynolds Tobacco Company Tobacco flavoring components of enhanced aromatic content and method of providing same
US6030462A (en) * 1998-10-22 2000-02-29 R.J. Reynolds Tobacco Company Smoking article having increased amino acid content
US6298858B1 (en) 1998-11-18 2001-10-09 R. J. Reynolds Tobacco Company Tobacco flavoring components of enhanced aromatic content and method of providing same
US6428624B1 (en) 1998-12-07 2002-08-06 R. J. Reynolds Tobacco Co. Method of providing flavorful and aromatic compounds
US6325860B1 (en) 2000-02-15 2001-12-04 R. J. Reynolds Tobacco Company Method of providing flavorful and aromatic compounds in absence of reducing sugars
US6440223B1 (en) 2000-02-15 2002-08-27 R. J. Reynolds Tobacco Co. Smoking article containing heat activatable flavorant-generating material
US6499489B1 (en) 2000-05-12 2002-12-31 R. J. Reynolds Tobacco Company Tobacco-based cooked casing formulation
US6695924B1 (en) 2000-07-25 2004-02-24 Michael Francis Dube Method of improving flavor in smoking article
CN100455220C (zh) * 2000-09-12 2009-01-28 菲利根有限公司 烟草烟雾过滤器
US6730832B1 (en) 2001-09-10 2004-05-04 Luis Mayan Dominguez High threonine producing lines of Nicotiana tobacum and methods for producing
US7025066B2 (en) * 2002-10-31 2006-04-11 Jerry Wayne Lawson Method of reducing the sucrose ester concentration of a tobacco mixture
DE602004002277T2 (de) * 2003-02-18 2007-04-05 Filligent Ltd. Filter enthaltend ein metallphthalocyanin und ein polykationisches polymer
US7581543B2 (en) * 2004-04-14 2009-09-01 Philip Morris Usa Inc. Reduction of phenolic compound precursors in tobacco
US20070137663A1 (en) * 2005-12-01 2007-06-21 R. J. Reynolds Tobacco Company Method of extracting sucrose esters from oriental tobacco
US20100037903A1 (en) * 2008-08-14 2010-02-18 R. J. Reynolds Tobacco Company Method for Preparing Flavorful and Aromatic Compounds
WO2010056627A1 (en) 2008-11-12 2010-05-20 Georgia-Pacific Chemicals Llc Method for inhibiting ice formation and accumulation
US9155772B2 (en) 2008-12-08 2015-10-13 Philip Morris Usa Inc. Soft, chewable and orally dissolvable and/or disintegrable products
US8434496B2 (en) * 2009-06-02 2013-05-07 R. J. Reynolds Tobacco Company Thermal treatment process for tobacco materials
US8944072B2 (en) * 2009-06-02 2015-02-03 R.J. Reynolds Tobacco Company Thermal treatment process for tobacco materials
US8991403B2 (en) 2009-06-02 2015-03-31 R.J. Reynolds Tobacco Company Thermal treatment process for tobacco materials
US8640714B2 (en) * 2009-11-12 2014-02-04 Philip Morris Usa Inc. Oral chewable tobacco product and method of manufacture thereof
CN102396775B (zh) * 2011-07-12 2013-07-03 广东中烟工业有限责任公司 烟梗提取液的处理工艺
CN102247009B (zh) * 2011-07-12 2013-04-10 广东中烟工业有限责任公司 烟梗提取液的美拉德反应工艺
US8716571B2 (en) 2011-09-21 2014-05-06 Reynolds Technologies, Inc. Tobacco having reduced amounts of amino acids and methods for producing such lines
CN102551187A (zh) * 2012-01-04 2012-07-11 安徽中烟工业有限责任公司 一种低co造纸法烟草薄片的制造方法
US9137958B2 (en) 2012-02-08 2015-09-22 Reynolds Technologies, Inc. Tobacco having altered amounts of environmental contaminants
US9485953B2 (en) 2012-07-19 2016-11-08 R.J. Reynolds Tobacco Company Method for treating tobacco plants with enzymes
GB201221207D0 (en) * 2012-11-26 2013-01-09 British American Tobacco Co Treatment of tobacco material
US9980509B2 (en) 2013-04-05 2018-05-29 R.J. Reynolds Tobacco Company Modification of bacterial profile of tobacco
US9155334B2 (en) 2013-04-05 2015-10-13 R.J. Reynolds Tobacco Company Modification of bacterial profile of tobacco
CN103989246B (zh) * 2014-05-28 2016-01-13 广州市澳键丰泽生物科技有限公司 一种增香膨化烟梗颗粒及其制备方法和应用
CN105249519B (zh) * 2015-11-13 2017-03-29 中国烟草总公司郑州烟草研究院 一种适用于新型卷烟的再造烟叶涂布液制备方法
CN105520192B (zh) * 2016-02-03 2018-11-09 云南中烟工业有限责任公司 一种卷烟滤嘴添加剂的制备方法及应用
CN105686068B (zh) * 2016-03-11 2017-05-10 湖南中烟工业有限责任公司 一种具有白肋烟风格的电子烟液
CN106118882B (zh) * 2016-07-04 2019-10-11 郑州大学 一种基于废弃烟末的烟用美拉德香精的制备方法
CN106174688B (zh) * 2016-07-22 2017-07-21 湖北中烟工业有限责任公司 一种制备晒红烟提取物的方法及其应用
US10813383B2 (en) 2016-12-12 2020-10-27 R.J. Reynolds Tobacco Company Dehydration of tobacco and tobacco-derived materials
CN107361398A (zh) * 2017-06-26 2017-11-21 河南中烟工业有限责任公司 一种五月茶提取物及其制备方法和在卷烟中的应用
US11278050B2 (en) 2017-10-20 2022-03-22 R.J. Reynolds Tobacco Company Methods for treating tobacco and tobacco-derived materials to reduce nitrosamines
CN111374342A (zh) * 2018-12-29 2020-07-07 贵州中烟工业有限责任公司 一种美拉德反应产物及其制备方法和应用
CN112205661A (zh) * 2020-11-19 2021-01-12 河南中烟工业有限责任公司 一种再造烟叶浓缩液处理方法
CN112471586B (zh) * 2020-11-20 2022-03-11 河北中烟工业有限责任公司 一种同时制备烟草精油和烟草露的方法
CN112425814B (zh) * 2020-11-20 2022-02-22 河北中烟工业有限责任公司 一种高香气烟草浸膏的制备方法
CN112931923B (zh) * 2021-02-02 2022-12-02 云南中烟工业有限责任公司 一种特定分子量肽美拉德中间体的制备方法、及其用于烟用香精的用途
CN113349415B (zh) * 2021-07-14 2023-04-28 云南中烟工业有限责任公司 提升抽吸品质的低温馏分的制备及其在加热卷烟中的应用
CN114788576B (zh) * 2022-04-07 2023-05-16 河南中烟工业有限责任公司 一种烤甜香突出的豫烟浸膏美拉德反应香料及其制备方法和应用

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3478015A (en) * 1966-11-14 1969-11-11 Yuki Gosei Yakuhin Kogyo Kk Process for reacting amino acid and an active carbonyl sugar in a polyhydric alcohol
LU64076A1 (de) * 1970-10-16 1972-04-21
US3920026A (en) * 1972-03-07 1975-11-18 Liggett & Myers Inc Tobacco with flavor enhancer
FR2389341A1 (de) * 1977-05-06 1978-12-01 Tabac Fab Reunies Sa
EP0024152A2 (de) * 1979-08-20 1981-02-25 Fabriques De Tabac Reunies S.A. Kontinuierliches Verfahren zur Denitrifikation von Tabakextrakten

Family Cites Families (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2103495A (en) * 1934-05-08 1937-12-28 Firm Ireks Ag Process for the production of valuable substances
US2564763A (en) * 1946-04-27 1951-08-21 Interchem Corp Baked goods with cheese flavor
BE638276A (de) * 1960-04-04
US3060031A (en) * 1960-08-01 1962-10-23 Little Inc A Chemically leavened bread process
US3132651A (en) * 1961-08-23 1964-05-12 Julius E Kiefer Smoking products and manufacture of the same
US3256889A (en) * 1962-11-30 1966-06-21 Burde Roger L De La Process for the treatment of tobacco
US3256888A (en) * 1962-11-30 1966-06-21 Burde Roger L De La Process for the treatment of tobacco
DE2045181A1 (en) * 1970-09-12 1972-03-16 Raban, Joachim, Dr., 2000 Schenefeld Tobacco treatment - by proteolytic enzyme infiltration in non -fermented material
US3722516A (en) * 1971-02-09 1973-03-27 Ja Monopoly Corp And Tanabe Se Smoking tobacco product and method of making the same
CH604562A5 (de) * 1975-07-25 1978-09-15 Maggi Ag
ZA763603B (en) * 1976-06-17 1978-03-29 Tobacco Res & Dev Tobacco products and methods for their preparation
LU79039A1 (de) * 1978-02-09 1979-09-06 Tabac Fab Reunies Sa Verfahren zum veredeln von tabak
DE2816427C2 (de) * 1977-05-06 1982-09-16 Fabriques de Tabac Réunies S.A., 2003 Neuchâtel Verfahren zum Veredeln von Tabak
US4308877A (en) * 1978-03-06 1982-01-05 Kimberly-Clark Corporation Method of making reconstituted tobacco having reduced nitrates
US4306577A (en) * 1979-04-12 1981-12-22 Philip Morris Incorporated Reaction flavors for smoking products
DE3100715A1 (de) * 1981-01-13 1982-07-22 Fabriques de Tabac Réunies S.A., 2003 Neuchâtel Verfahren zur aufbereitung von tabak und tabak, aufbereitet nach diesem verfahren

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3478015A (en) * 1966-11-14 1969-11-11 Yuki Gosei Yakuhin Kogyo Kk Process for reacting amino acid and an active carbonyl sugar in a polyhydric alcohol
LU64076A1 (de) * 1970-10-16 1972-04-21
US3920026A (en) * 1972-03-07 1975-11-18 Liggett & Myers Inc Tobacco with flavor enhancer
FR2389341A1 (de) * 1977-05-06 1978-12-01 Tabac Fab Reunies Sa
EP0024152A2 (de) * 1979-08-20 1981-02-25 Fabriques De Tabac Reunies S.A. Kontinuierliches Verfahren zur Denitrifikation von Tabakextrakten

Also Published As

Publication number Publication date
US4407307A (en) 1983-10-04
US4537204A (en) 1985-08-27
EP0056268B1 (de) 1984-10-10
EP0056268A1 (de) 1982-07-21
DE3100715A1 (de) 1982-07-22
EP0056073B1 (de) 1984-11-07
DE3167104D1 (en) 1984-12-13
DE3260912D1 (en) 1984-11-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP0056073A1 (de) Verfahren zur Aufbereitung von Tabak und Tabak, aufbereitet nach diesem Verfahren
DE69836548T2 (de) Hefeextraktzusammensetzung, hefe zur herstellung derselben und verfahren zur herstellung einer hefeextraktzusammensetzung
DE69937062T2 (de) Verfahren zur isolierung einer beta-glucan-zusammensetzung aus hafer sowie daraus hergestellte produkte
DE2751572A1 (de) Verfahren zur herstellung eines lipid-protein-nahrungsmittelprodukts
DE1792142A1 (de) Verfahren zur Herstellung eines Viehfuttermittels aus Sojamehl
EP0309523B1 (de) Gesamteiweiss-abbauprodukt
DE2109084C3 (de) Verfahren zur Herstellung von Würzmitteln, deren Geschmack dem von gebratenem Rindfleisch ähnlich ist
CH634469A5 (en) Method of upgrading tobacco
DE2357119C3 (de) Verfahren zur Herstellung eines stabilen L-Lysin-Konzentrats mit hohem Gehalt an essentiellen Biofaktoren
DE3223150A1 (de) Aminosaeuregemische, verfahren zu deren herstellung
DE2600239A1 (de) Verfahren zur herstellung einer konzentrierten, gezuckerten pflanzlichen milch
DE3141174A1 (de) Verfahren zur herstellung von mitteln zur verwendung in der lebensmittelindustrie und fuer futterzwecke durch verarbeiten von cyanhaltigen tropischen knollenpflanzen
DE1692783A1 (de) Verfahren zur Herstellung von 5-Nucleotide enthaltenden Wuerzstoffgemischen
DE2038258C3 (de) Verfahren zur Herstellung eines praktisch faserfreien Futtermittels aus grünen Pflanzen
DD266960A1 (de) Verfahren zur gewinnung multifunktioneller loeslicher produkte mit hohem protein- und pentosangehalt aus roggenkoernern
DE2543647A1 (de) Proteinhaltiger naehrstoff, verfahren zu seiner herstellung und diese naehrstoffe enthaltende nahrungsmittel
DE2546008A1 (de) Verfahren zur herstellung eines aromatisierungsmittels
DE3617368C2 (de) Verfahren zur Herstellung eines stickstoffhaltigen Polysaccharids
AT262197B (de) Verfahren zur Herstellung eines Hydrolysates aus Hefen
DE1049684B (de) Verfahren zur Herstellung eines genußfahigen Protemhvdrolysates aus dem Fischpreßwasser
DE1210667B (de) Verfahren zur Herstellung mononatriumglutamathaltiger Futterzusatzmittel
DE2220299A1 (de) Verfahren zur Herstellung löslicher Proteine
DE2219712A1 (de) Verfahren zur Herstellung löslicher Proteine
DE1517732C3 (de) Mikrobiologisches Verfahren zur Herstellung hochaktiver Protease
DE1492703C (de) Verfahren zur Herstellung von kandier ten Fruchten

Legal Events

Date Code Title Description
PUAI Public reference made under article 153(3) epc to a published international application that has entered the european phase

Free format text: ORIGINAL CODE: 0009012

17P Request for examination filed

Effective date: 19820423

AK Designated contracting states

Designated state(s): BE CH DE FR GB IT NL

ITF It: translation for a ep patent filed

Owner name: FIAMMENGHI - DOMENIGHETTI

GRAA (expected) grant

Free format text: ORIGINAL CODE: 0009210

AK Designated contracting states

Designated state(s): BE CH DE FR GB IT LI NL

REF Corresponds to:

Ref document number: 3167104

Country of ref document: DE

Date of ref document: 19841213

ET Fr: translation filed
PLBE No opposition filed within time limit

Free format text: ORIGINAL CODE: 0009261

STAA Information on the status of an ep patent application or granted ep patent

Free format text: STATUS: NO OPPOSITION FILED WITHIN TIME LIMIT

26N No opposition filed
ITTA It: last paid annual fee
PGFP Annual fee paid to national office [announced via postgrant information from national office to epo]

Ref country code: GB

Payment date: 19940831

Year of fee payment: 14

PGFP Annual fee paid to national office [announced via postgrant information from national office to epo]

Ref country code: FR

Payment date: 19940919

Year of fee payment: 14

PGFP Annual fee paid to national office [announced via postgrant information from national office to epo]

Ref country code: DE

Payment date: 19940923

Year of fee payment: 14

PGFP Annual fee paid to national office [announced via postgrant information from national office to epo]

Ref country code: NL

Payment date: 19940930

Year of fee payment: 14

PGFP Annual fee paid to national office [announced via postgrant information from national office to epo]

Ref country code: BE

Payment date: 19941007

Year of fee payment: 14

PGFP Annual fee paid to national office [announced via postgrant information from national office to epo]

Ref country code: CH

Payment date: 19941019

Year of fee payment: 14

PG25 Lapsed in a contracting state [announced via postgrant information from national office to epo]

Ref country code: GB

Effective date: 19950918

PG25 Lapsed in a contracting state [announced via postgrant information from national office to epo]

Ref country code: LI

Effective date: 19950930

Ref country code: CH

Effective date: 19950930

Ref country code: BE

Effective date: 19950930

BERE Be: lapsed

Owner name: FABRIQUES DE TABAC REUNIES S.A.

Effective date: 19950930

PG25 Lapsed in a contracting state [announced via postgrant information from national office to epo]

Ref country code: NL

Effective date: 19960401

GBPC Gb: european patent ceased through non-payment of renewal fee

Effective date: 19950918

REG Reference to a national code

Ref country code: CH

Ref legal event code: PL

PG25 Lapsed in a contracting state [announced via postgrant information from national office to epo]

Ref country code: FR

Effective date: 19960531

PG25 Lapsed in a contracting state [announced via postgrant information from national office to epo]

Ref country code: DE

Effective date: 19960601

NLV4 Nl: lapsed or anulled due to non-payment of the annual fee

Effective date: 19960401

REG Reference to a national code

Ref country code: FR

Ref legal event code: ST